成都代怀捐卵医院_移植胚胎数量和辅助孵化对高龄不孕症患者助孕临床结局的

【成都40多岁代怀】

丁锦丽，杨菁，李风跟

（武汉大学人民病院生殖医学中心，武汉 430060）

【择要】目标 剖析移植胚胎数目跟帮助孵化对高龄妇女助孕终局的影响，商量削减移植胚胎数目及勾销帮助孵化对这类患者的可行性。

方式回顾性剖析初次帮助生殖技巧（ART）助孕的高龄患者（35-37岁）的395个周期的临床材料，依据是不是止激光帮助孵化（LAH）分为LAH组（n=274）跟对照组（n=121），剖析两组患者的受精及胚胎的环境及其怀胎率跟莳植率的差别。

成果两组患者岁数、不孕年限、BMI、不孕类型、根底FSH程度及不孕因素等材料及获卵数、受精方法、取得优良胚胎数及卵裂环境均无显著差别（P＞0.05）；LAH组移植的胚胎数（2.450.50）显著高于对照组（2.000.00）（P＜0.001），但两组的莳植率（28.06% vs. 30.99%）、临床怀胎率（48.91% vs. 48.76%）、流产率（23.13% vs. 22.03%）、多胎怀胎率（10.94% vs.9.09%）及新生儿终局均无统计学差别（P＞0.05）；LAH组中移植2枚或3枚胚胎的周期有念逝世的临床终局，但移植3枚多胎怀胎率有降低趋向，但无统计学差别（P＞0.05）。

论断 关于35-37岁高龄初次助孕且有优良胚胎移植的患者，发起移植2枚胚胎，且LAH并未改良其临床终局。

【关键词】激光帮助孵化；移植胚胎数；临床怀胎率；莳植率

胚胎的胜利着床是一个庞大的进程，波及到子宫内膜容受性、胚胎质量等多方面的因素，此中通明带的孵化是一个至关重要的步调，胚胎孵化的失利能够是影响帮助生殖技巧（ART）终局的一个紧张因素。帮助孵化人为天毁坏通明带，从而进步ART的胚胎植入才能。现阶段海内止胚胎植入前帮助孵化的次要适应症有高龄、重复着床失利、冻胚周期、卵母细胞体外成熟、通明带增厚的患者。此中非接触式激光帮助孵化（LAH）是最罕见的方式。对于帮助孵化对ART终局的影响借存在争议，大部分研讨认为LAH能改良冻胚周期重复莳植失利或高龄患者的临床终局，进步其莳植率跟怀胎率，且LAH对围产期终局不晦气影响，有学者认为其可能改良岁数35岁或屡次ART助孕失利患者的临床终局，也有研讨认为其对临床终局不显著影响。也有研讨认为，关于岁数38岁的患者来讲，LAH能明显改善胚胎的莳植率。我国卫生跟计划生育委员会划定，关于初次助孕岁数＜35岁的患者移植胚胎数不应高于2枚，35岁患者移植胚胎数没有高于3枚。现阶段已有少许对于岁数35岁患者胚胎移植数目关于怀胎终局影响的报导。海内生殖中间关于取舍哪些年龄段女性（初次助孕）的新颖周期止LAH的定见并没有同等。关于岁数介于35-37岁、初次止ART助孕患者来讲，是不是有需要止LAH，移植几枚胚胎适合，现阶段借不临床研讨及国度层面的同一指南。本项研讨的目标在于剖析削减移植胚胎数目及勾销帮助孵化对高龄不孕症患者助孕临床终局的影响，从而为临床供给参考。

材料与方式

一、研讨工具

网络2010年1月至2014年6月正在武汉大学人民病院生殖医学中心止IVF/ICSI助孕的配偶的材料。不孕缘故原由包罗盆腔及输卵管、子宫内膜异位症、排卵阻碍等女方因素、男方因素及不明缘故原由不孕的患者，不孕工夫1-18年。

归入尺度：1.岁数35-37岁；2.初次止ART助孕；3.新颖周期第3天移植2-3枚优良卵裂期胚胎。消除尺度：消除果子宫内膜、卵巢适度安慰征、胚胎质量等缘故原由而勾销移植的周期。

共归入395个周期，依据是不是止激光帮助孵化LAH分为LAH组（n=274）跟对照组（n=121）。

两、医治方式回想

1.卵巢功能评价及促排卵：起头促排前于患者月经D2-3检测根底FSH程度。采取我中间通例利用的超长计划、少计划及短计划促排卵。阴道超声示3个以上直径18mm的卵泡时，打针5000-10000U的人绒毛膜促线性激素（HCG，雪兰诺，瑞士），打针后36h正在阴超引诱下采卵。依据北方精子质量采用天然受精或卵胞浆内单精子打针（ICSI）受精。

2.胚胎质量评价：D3对胚胎形态学停止分级：6个平均同等的卵裂球且细胞碎片＜20%的胚胎为优良胚胎。

3.LAH：正在D3胚胎形态学评价后停止。将微滴置于显微镜视线中心，取舍碎片较集合或卵周空隙年夜的区域，沉移栽物台使非接触式激光（MTG激光破膜仪，德国）对焦于胚胎通明带，调剂激光发射量（1480nm），发射激光削薄通明带，终极使削薄深度为通明带厚度的2/3，通明带造成一个25-30m孔径的启齿，然后将胚胎洗涤后移入培养皿。

4.胚胎移植：受精后第3天行胚胎移植，移植后止黄体酮（浙江仙琚药业）撑持医治。我中间关于新颖周期中岁数35岁的患者通例止LAH，普通移植胚胎3枚。自2013年7月后将通例LAH岁数界定为38岁，且关于岁数＜38岁的患者移植2枚胚胎。

以是，本研讨中的对照组为2013年7月后接管医治的35-37岁患者，移植胚胎2枚；而LAH组为2013年7月前接管医治者，移植胚胎2或3枚。

三、剖析目标及剖断尺度

比力两组患者岁数、不孕年限、移植胚胎数等根底材料及莳植率、临床怀胎率、流产率及新生儿终局等材料。

胚胎移植后14d检测血清-HCG＞10U/L，2周后B超下见孕囊肯定为临床怀胎。活产率界说为临盆周期数/移植周期数X100%；多胎怀胎率界说为多胎怀胎例数/移植周期数X100%（本项研讨中多胎均为双胞胎）。

四、统计学剖析

使用SPSS19.0统计学软件停止剖析。计量材料成果以均数标准差（s）默示，计数材料以率（%）默示。定量材料比力采取t磨练，定性材料的比力采取x2磨练。P＜0.05为差别有统计学意思。

成果

一、两组根底材料比力

本项研讨共归入395个周期，LAH组274周期，对照组121周期。

LAH组原发不孕配偶为80对（29.2%），对照组为37对（30.57%）；LAH组男性

不育因素占26.07%，女性因素占87.67%，不明缘故原由占0.70%；对照组男性不育因素、女性因素、不明缘故原由离别占32.77%，90.91%跟0.83%。两组患者的岁数、不孕工夫、BMI、不孕类型、根底FSH程度及不孕缘故原由的医治均无显著差别（P＞0.05）（表1）。

两、两组患者受精及胚胎环境比力

395例患者共移植912枚胚胎，莳植率为28.83%（263/912），临床怀胎率为48.85%（193/395）。两组患者均匀移植的胚胎数有统计学差别（P＜0.01），但两组的莳植率（28.06% vs. 30.99%）

及临床怀胎率（48.91% vs. 48.76%）均无显著差别（P＞0.05），流产率及多胎怀胎率也无显著差别（23.13% vs. 22.03%、10.94% vs. 9.09%）（P＞0.05）（表3）。

表1 两组患者根本材料【s，n（%）】

组别 周期数 岁数（岁） 不孕工夫（年） BMI（kg/m2） 原发不孕

LAH组

对照组 274

121 35.820.82

35.830.80 6.484.16

6.573.75 21.963.16

22.133.37 80（29.20）

37（30.57）

组别 周期数 根底FSH（U/L） 不育缘故原由

男性因素 女性因素 不明缘故原由

LAH组 274 7.172.29 71（26.07） 240（87.67） 2（0.70）

对照组 121 6.822.32 39（32.77） 110（90.91） 1（0.83）

表2 两组患者受精及胚胎环境比力【s，n（%）】

组别 周期数 均匀获卵数（枚） 总获卵数（枚） IVF ICSI 卵裂率 优良胚胎数（枚）

LAH组 274 11.624.87 3185 208（75.91） 66（24.09） 2311（97.76） 5.122.66

对照组 121 12.245.46 1481 86（71.08） 35（28.93） 1024（98.08） 4.742.81

表3两组患者的临床终局【s，n（%）】

组别 周期数 均匀移植数（枚） 移植数（枚） 莳植率 临床怀胎率 流产率 多胎怀胎率

LAH组 274 2.450.05 670 188（28.06） 134（48.91） 31（23.13） 30（10.94）

对照组 121 2.000.00 242 75（30.99） 59（48.76） 13（22.03） 11（9.09）

注：与对照组比拟，P＜0.01

四、两组患者的新生儿终局比力

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LAH组活产103个周期，此中30个周期为多胎怀胎，73个周期为单胎怀胎；对照组活产46个周期，11个周期多胎怀胎，35个周期单胎怀胎LAH组早产率为19.42%（20/103），对照组为21.74%（10/46）；LAH组低诞生体重儿比例为25.24%（26/103），对照组为23.91%（11/46）。两组患者的早产率、低诞生体重率、怀胎天数及单胎诞生体重跟多胎整体重均无显著差别（P＞0.05）（表4）。

五、移植胚胎数对怀胎终局的影响

因为组间移植胚胎数存在显著差别，为了明白分歧移植胚胎数和LAH对临床终局的影响，咱们进一步将研讨工具依照移植胚胎数分组，LAH组中移植2枚胚胎的周期为A组（152例），3枚胚胎者为B组（122例），比力A组、B组及对照组的临床终局。A组、B组及对照组组间的岁数、不孕年限、BMI、FSH等根底材料均无显著差别（P＞0.05）。对照组、A组及B组组间临床怀胎率及多胎怀胎率均无显著差别（P＞0.05），B组活产率较对照组及A组均有降低趋向，但无统计学差别（P＞0.05）（表5）。

表4 两组患者新生儿终局比力【s，n（%）】

组别 活产周期数 怀胎工夫（d） 早产率 诞生体重 低诞生体重率

单胎 多胎

LAH组 103 265.8913.66 20（19.42） 3256.16540.70 4966.431073.49 26（25.24）

对照组 46 265.1916.98 10（21.74） 3160.29533.11 5088.18894.06 11（23.91）

注：早产是指孕周＜37周，低诞生体重指出死体重＜2500g

表5 分歧移植胚胎数患者的临床终局【s，n（%）】

组别 周期数 岁数（岁） 不孕工夫（年） BMI（kg/m2） 原发不孕 根底FSH（U/L）

对照组 121 35.830.80 6.573.75 22.133.37 37（30.58） 6.822.32

A组 152 35.710.68 6.524.22 21.993.26 39（25.66） 6.862.23

B组 122 35.900.84 6.424.09 22.003.04 41（33.61） 7.052.33

组别 周期数 优良胚胎数（枚） 移植胚胎数（枚） 临床怀胎率 活产率 多胎怀胎率

对照组 121 4.742.81 2.000.00 59（48.36） 45（37.19） 11（9.09）

A组 152 5.222.83 2.000.00 73（48.02） 55（36.18） 16（10.53）

B组 122 4.992.43 3.000.00 60（49.18） 48（39.34） 14（11.48）

讨 论

LAH是不是可能增长胚胎着床的服从迄今依然存在争议。通明带是由糖类、蛋白质等构成的包绕正在卵子跟胚胎核心的糖蛋白基质层。正在心理形态下，跟着囊胚的扩张通明带变薄，卵白水解酶得以开释以水解通明带，从而使囊胚孵出，正在子宫内膜与滋养层细胞的相互作用下实现着床。胚胎孵化的失利是招致生育能力降低的缘故原由之一。ART进程中体外培育的进程使通明带变硬、增厚及弹性降低，降低了胚胎孵出的才能，影响临床终局。此外，女性岁数的增长也能够降低通明带的薄化才能，使通明带变硬，孵出胚胎难题，从而惹起胚胎着床失利。跟着科学技术的开展，包罗酵素、蛋白酶、振动器跟激光灯多种技巧已用于帮助孵化，应用激光、化学或机器的方式使通明带厚度变薄，增进胚胎从通明带中孵出。

非接触式LAH是现阶段最常用的方式，激光经由过程显微镜经液体传导至通明带，应用热效应使通明带发烧融解。正在LAH中经由过程调剂激光的功率、作用工夫及脉冲次数去节制激光的总能量，到达融解通明带的目标。激光正在通明带上发生正确的圆柱形小孔，LAH平安、快捷、轻便、易于控制的特色使其已成为许多生殖中间的通例帮助方式，用于重复着床失利、高龄、胚胎质量较差或冻胚移植的患者。

对于LAH对ART终局是不是有改良作用，现阶段借存在争议。多项研讨结果表明，LAH能够经由过程机器方法增进孵化进程及容许胚胎与子宫内膜初期打仗，从而增长胚胎的着床才能，进步患者的莳植率及临床怀胎率。然而，杜生荣等的研讨结果表明，LAH并不克不及明显改善胚胎的着床才能，因此认为LAH对新颖D3胚胎的终局不较着的改良。也有研讨评释，即便是冻胚周期，LAH对临床终局也不较着的改良作用。以岁数介于35-37岁且初次ART助孕的患者为研讨工具，咱们的结果表明虽然LAH组D3移植的优良胚胎数显著高于对照组，但两组的莳植率、临床怀胎率、流产率及新生儿终局均无显著差别。是以咱们认为，关于那类人群，LAH并不克不及改良其临床终局，那与Valojerdi等、Hageman等报导的帮助孵化并不克不及改良岁数＜38岁患者的临床终局这一论断同等。

研讨报导削减移植的胚胎数能够降低患者的临床怀胎率。但有研讨评释，若患者有充足的优良胚胎，移植2枚胚胎对临床怀胎率不很大影响，且没有影响35-37妇女的屡次IVF-ET的怀胎率，同时也降低了其多胎怀胎的危险。黄仲英等的研讨评释，35-36岁的患者移植2枚及3枚胚胎所取得的临床怀胎率不差别，但移植3枚胚胎的患者有较下的多胎怀胎率。咱们的研讨也评释，虽然LAH组移植的胚胎数显著高于对照组，但仅移植2枚胚胎的对照组也取得与LAH组类似的莳植率及临床怀胎率，那与后面学者的研讨成果同等。美国生殖医学降低多胎怀胎的指南也指出：35-37岁初次IVF-ET助孕时发起移植的卵裂期胚胎数没有跨越2个。是以咱们认为关于35-37岁初次助孕且有优良胚胎移植的患者，发起将移植胚胎数由3枚降为2枚。

咱们研讨结果表明，LAH组中移植2枚胚胎与3枚胚胎组间临床怀胎率及活产率不显著差别，即35-37岁的高龄妇女移植2枚或3枚胚胎可取得类似的临床终局，但移植3枚胚胎组有较下的多胎怀胎率；当移植胚胎数均为2枚时，止LAH跟对照组的莳植率、临床怀胎率及活产率不显著差别，但LAH组多胎怀胎率有降低趋向（P＞0.05）。有研讨评释LAH的激光热效应能够会对胚胎发生必然的影响，植物试验显现，1480nm的激光二极管对小鼠D3的胚胎停止孵化处置惩罚后，小鼠胚胎植入及植入后的发育潜能均遭到影响。现阶段缺乏对于LAH热效应对人类新生儿发育、胎儿畸形等成果的评价的研讨。此外，有研讨发明LAH后的单卵多胎率降低，能够增长妇女围产期、分娩期及新生儿染色体异常等危险。是以，必需思量止LAH对妇女及子代安全性的影响。

总之，咱们的结果表明，关于岁数介于35-37岁且初次ART助孕、D3移植优良胚胎的妇女来讲，移植2枚胚胎与移植3枚胚胎有类似的临床终局，LAH并未改良其莳植率、临床怀胎率、流产率及新生儿终局。思量到LAH能够带来的多胎、发育异常等潜伏危险，临床大夫正在事情中应综合多方面因素停止决议计划。依据咱们的研讨材料发起35-37岁且初次ART助孕的患者移植2枚胚胎，且没有发起止LAH。可是，本项研讨是一个时间跨度比力年夜，样本量较小的回顾性研讨，此外，作为一项前后比照的研讨（LAH组合对照组有明白的工夫前后），药物、试剂和技巧方面的刷新也能够对研讨成果存在滋扰。是以，其论断的可靠性借待进一步研讨。